無菌室建設要求使用與管理辦法

無菌室建設要求使用與管理辦法
 
1．工作室應矮小、平整，面積只需4米2左右，高2.2―2.3米，內部裝修應平整、光滑，無凹凸不平或棱角等，四壁及屋頂應用不透水之材質，便于擦洗及殺菌。
 
2．室內采光面積大，從室外應能看到室內情況。
 
3．為保證無菌室的潔凈，無菌室周圍需設緩沖走廊，走廊旁再設緩沖間，其面積可小于無菌室。
 
4．無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及供消毒空氣用紫外燈，殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜，其電源開關均應設在室外。
 
5．無菌室與緩沖間進出口應設拉門，門與窗平齊，門縫要封緊，兩門應錯開，以免空氣對流造成污染。
 
6．無菌室的使用與管理
 
（1）無菌室應保持清潔整齊，室內僅存放必須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環、玻璃鉛筆等。&不要放與檢測無關的物品
 
（2） 室內檢驗用具及凳桌等保持固定位置，不隨便移動。
 
（3）每2―3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面，然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣，最后紫外燈殺菌半小時
 
（4）定期檢查室內空氣無菌狀況，細菌數應控制在10個以下，發現不符合要求時，應立即徹底消毒滅菌。/無菌室無菌程度的測定方法：取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養基平板各3個（平板直徑均9厘米），置無菌室各工作位置上，開蓋曝露半小時，然后倒置進行培養，測細菌總數應置37℃溫箱培養48小時；測霉菌數則應置27℃溫箱培養5天。細菌`霉菌總數均不得超過10個為。
 
（5）無菌室殺菌前，應將所有物品置于操作之部位（待檢物例外），然后打開紫外燈殺菌30分鐘，時間一到，關閉紫外燈待用
 
（6）進入無菌室前，必須于緩沖間更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。
 
（7） 操作應嚴格按照無菌操作規定進行，操作中少說話，不喧嘩，以保持環境的無菌狀態。
 
無菌室建設要求使用與管理辦法
 
微生物檢驗用器材及場所必須進行滅菌或消毒處理，不同的對象采用不同的處理方法。
 
1． 高壓蒸汽滅菌:工作服、口罩、稀釋液等，置高壓殺菌鍋內，一般采用121℃滅菌半小時,當然不同的培養基有不同的要求,應分別處理
 
2． 火焰滅菌： 接種針、接種環等可直接火焰滅菌
 
3． 高溫干燥滅菌： 各種玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃滅菌2小時
 
4． 一 般消毒:無菌室內的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進行滅菌，必須用其他方法進行消毒處理，采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒，工作人員的手也用此法進行消毒
 
5． 空氣的消毒： 開啟紫外燈照射30―60分鐘 即可。
 
無菌室建設要求使用與管理辦法
 
1． 先進行無菌室空間的消毒，開啟紫外燈30―60分鐘
 
2． 檢驗用的有關器材， 搬入無菌室前必須分別進會滅菌消毒
 
3． 操作人員必須將手清洗消毒，穿戴好無菌工作衣、帽和鞋，才能進入無菌室
 
4． 進入無菌室后再一次消毒手部，然后才進行檢驗操作
 
無菌室建設要求使用與管理辦法
 
1． 動作要輕，不能太快，以免攪動空氣增加污染；玻璃器皿也應輕取輕放，以免破損污染環境
 
2． 操作應在近火焰區進行。
 
3． 接種環、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒，灼燒時先通過內焰，使殘物烘干后再灼燒滅菌
 
4． 使用吸管時，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作。
 
5． 觀察平板時不好 開蓋，如欲沾取菌落檢查時，必需靠近火焰區操作，平皿蓋也不能 大開，而是上下蓋適當開縫。
 
6．進行可疑致病菌涂片染色時，應使用夾子夾持玻片，切勿用手直接拿玻片，以免造成污染，用過的玻片也應置于消毒液中浸泡消毒，然后再洗滌。
 
7． 工作結束，收拾好工作臺上的樣品及器材，最后用消毒液擦拭工作臺。
 
無菌室管理規定
 
1. 無菌室地面、臺面、其它表面每日晨擦拭1次。超凈臺每日晨75%酒精擦拭超凈臺消毒，每次使用前準備好物品，將超凈臺紫外滅菌30分鐘后方可使用。
 
2. 從室外帶入無菌室內的所有物品表面要用75%酒精或紫外照射預先消毒。無菌操作前75%酒精消毒手掌、手背。整個操作嚴格執行無菌操作。
 
3. 每人次使用后，臺內物品全部取出并用消毒液噴灑消毒用后的物品歸位，垃圾帶出無菌室。連續使用時間超過1小時，請預約登記。
 
4. 無菌室內電腦生物反應器專用，閑人免用。使用后將防塵罩罩上，防止紫外直接照射。
 
5. 無菌室內定期消毒滅菌：噴灑3-5%石炭酸溶液并用2-3%來蘇水擦洗桌面、凳子，無菌室內噴霧消毒后，紫外滅菌30分。每周一次。
 
6. 無菌室內無菌狀況定期檢測：滅菌后的接種室內桌上和桌下各放一套培養基平皿，暴露15分鐘，蓋上，37℃培養24小時，每個平皿的菌落≤4，則認為效果良好，否則需延長照射時間或加強其它措施。每周一次。
 
7. 滅菌后物品放在指定位置，注明滅菌日期，高壓滅菌物品可存放7-14天，過期不能再用，需重新包裝滅菌。
 
8. 所有準備進入無菌室工作的人員必需首先了解細胞培養的基本要求和操作規范，并進行必要的培訓。
 
9. 進入無菌室前需提交相關實驗計劃：包括使用細胞種類、數量；所需試劑種類，試劑是否有毒；培養液種類；實驗時間等。不歡迎沒有計劃和計劃不可行的人員進行漫無目的的測試。
 
10. 每一個研究人員的培養細胞；細胞培養箱內的位置；培養液；消化液；消毒物品；消毒物品擺放位置等都固定化，并作好標記。禁止交叉亂用，亂放，造成可能的污染擴大，所有研究人員未經本人許可不得使用他人的物品和位置。
 
11. 通用性的液體（如培養液、消化液、生理鹽水、鈣溶液）由管理人員統一配制，專人管理，便于進行質量控制和研究人員的計費。研究人員根據需要申領，并作好標記，做到專人專物專用，嚴禁未經他人許可亂用他人物品。培養液只有在用完后可再申領新瓶，防止浪費。
 
12. 研究生實驗用物品領取登記后自己保存管理。實驗前泡酸、包裝和消毒，實驗后及時洗刷、干燥、歸位。